O reagente de ensaio XylX6 para a medição de endo-xilanase (endo-1,4-β-xilanase) contém dois componentes: 1) 4,6-O-(3-cetobutilideno)-4-nitrofenil-β-D-glucosil-xilopentaosídeo e 2) β-xilosidase.

O grupo bloqueador do tipo cetona impede qualquer ação hidrolítica da β-xilosidase ou de outras glicosidases de ação exo sobre o substrato XylX6. A incubação com uma endo-xilanase gera um oligossacarídeo colorimétrico não bloqueado, que é rapidamente hidrolisado pela β-xilosidase auxiliar.

Portanto, a velocidade de formação de 4-nitrofenol está diretamente relacionada à hidrólise do XylX6 pela endo-xilanase. A reação é interrompida e a cor do fenolato é revelada mediante a adição de solução tampão Tris (pH = 10,0).