Kit de Ensaio de Atividade de Celulase.

O reagente de ensaio CellG5 para a medição de endo-celulase (endo-1,4-β-glucanase) contém dois componentes: 1) 4,6-O-(3-cetobutilideno)-4-nitrofenil-β-D-celopentaosídeo (BPNPG5) e 2) β-glicosidase termoestável. O grupo bloqueador do tipo cetona impede qualquer ação hidrolítica da β-glicosidase sobre o BPNPG5. A incubação com uma endo-celulase gera um oligossacarídeo colorimétrico não bloqueado, que é rapidamente hidrolisado pela β-glicosidase auxiliar. Portanto, a velocidade de formação de 4-nitrofenol está diretamente relacionada à hidrólise do BPNPG5 pela endo-celulase. A reação é interrompida e a cor do fenolato é revelada mediante a adição de solução tampão Tris (pH 9,0).

O ensaio CellG5 representa um grande avanço na metodologia de medição de celulase, que tradicionalmente dependia de substratos como CM-celulose, Avicel, celooligossacarídeos, papel de filtro ou polissacarídeos corados, incluindo CMC-Vermelho Congo ou celulose-azure.